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荧光定量PCR,为什么它是新冠核酸检测的“黄金标准”?

2025-07-01 08:10 河南广播电视台安全健康直通车

在探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的检测方法中,荧光定量PCR技术,尤其是实时荧光定量PCR,占据了举足轻重的地位,被誉为新冠核酸检测的“黄金标准”。这一称号的背后,蕴含着荧光定量PCR技术的多个核心优势和专业特性。

一、技术原理与优势

荧光定量PCR技术,包括传统的终点法和更为先进的实时荧光定量法,均基于聚合酶链反应(PCR)原理,通过扩增目标DNA或RNA序列来检测其存在与否及浓度高低。实时荧光定量PCR在PCR反应过程中,利用荧光染料或探针的特异性结合,实时监测扩增产物的累积,从而绘制出扩增曲线,并根据达到预设阈值的循环数(Ct值)来推断原始模板的数量。

高灵敏度与特异性:实时荧光定量PCR能够检测到极微量的病毒核酸,即使在病毒载量较低的情况下也能准确识别,大大减少了假阴性的可能。其特异性则得益于引物和探针的精确设计,能够准确区分目标病毒与其他病原体。

动态监测与精确定量:与传统终点法相比,实时荧光定量PCR能够实时获取扩增数据,通过扩增曲线的形状和Ct值的变化,不仅可以判断样本中是否存在目标病毒,还能对其浓度进行精确定量。这对于评估病情进展、治疗效果及病毒变异具有重要意义。

快速高效:虽然每个PCR反应需要一定时间,但实时荧光定量PCR通过自动化设备和高效的工作流程,能够在较短时间内处理大量样本,满足大规模筛查和紧急情况下的快速响应需求。

二、在新冠检测中的应用

新型冠状病毒属于RNA病毒,其核酸检测试剂盒通常基于实时逆转录和实时荧光定量PCR(RTPCR)技术,通过扩增病原体的RNA并实时检测扩增产物来诊断新冠病毒感染。

早期诊断:实时荧光定量PCR能够在患者症状出现前或症状轻微时检测到病毒核酸,有助于早期发现和隔离感染者,有效控制疫情传播。

多靶标检测:为了提高检测的准确性和可靠性,新冠核酸检测试剂盒通常设计针对病毒基因组中的多个保守序列进行扩增和检测。这不仅可以防止因病毒突变导致的假阴性结果,还能通过多重检测缩短检测时间。

临床适用性:实时荧光定量PCR技术广泛应用于医院、疾控中心等临床和公共卫生机构,成为新冠病毒感染确诊的重要依据。其准确性和可靠性得到了国内外广泛认可和验证。

三、与其他检测方法的比较

虽然抗体检测和抗原检测也是新冠病毒感染的重要检测手段,但它们在灵敏度和特异性方面存在局限性。抗体检测虽然方便快捷,但“假阳性”和“假阴性”率较高,不适用于一般人群的筛查;抗原检测虽然操作简便、出结果快,但其检测率相对较低,容易漏检。相比之下,荧光定量PCR技术以其高灵敏度、高特异性和精确定量的能力,在新冠核酸检测中占据了主导地位。

综上所述,荧光定量PCR技术,尤其是实时荧光定量PCR,凭借其独特的技术优势和在临床应用中的卓越表现,成为了新冠核酸检测的“黄金标准”。这一地位的确立,不仅得益于其科学严谨的检测原理和方法,更在于其在实际应用中展现出的高效、准确和可靠的检测能力。

(张松涛 驻马店市中心医院 医学检验科 主管技师)


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