病理切片制作过程是一个严谨且精细的流程，涉及从活体组织取样到最终制成可供显微镜观察的玻片的多个步骤。以下是详细的制作过程：
一、活体组织取样与初步处理
取样：
医生在手术室或活检室中，根据患者的具体病情和诊断需求，使用手术器械从患者体内切取病变组织或疑似病变组织作为病理标本。
取样过程需要确保标本的完整性、代表性和无菌性，同时避免对周围组织造成不必要的损伤。
固定：
取下的病理标本需要立即放入10%的中性福尔马林或其他适宜的固定液中进行固定。
固定的目的是防止组织腐败、变形和细胞自溶，同时保持细胞形态和结构，为后续的处理和观察提供良好的基础。
固定时间因标本大小和类型而异，小标本通常需要固定4-6小时，大标本则需要6-12小时或更长时间。
二、标本的进一步处理与制片
洗涤与脱水：
固定完成后，标本需要进行洗涤，以去除固定液残留。
随后，标本将放入一系列不同浓度的酒精中进行脱水处理，逐步去除组织中的水分。
脱水过程需要持续一段时间，以确保组织完全脱水，为后续的浸蜡和包埋做准备。
透明：
脱水完成后，标本需要进行透明处理。
透明过程通常使用二甲苯等有机溶剂，使组织变得透明，便于后续的浸蜡和切片。
透明处理的时间根据标本的大小和类型而定。
浸蜡与包埋：
透明完成后，标本将被浸入熔化的石蜡中，以替代组织中的透明剂。
浸蜡过程需要持续一段时间，以确保石蜡完全渗透到组织中。
随后，将浸好蜡的组织块放入包埋框中，倒入液态石蜡进行包埋。
包埋完成后，待石蜡凝固，即可得到包含病变组织的蜡块。
切片：
将包埋好的蜡块固定在切片机上，进行切片。
切片厚度通常为3-4微米，以确保切片能够清晰地显示组织结构和细胞形态。
切片过程需要精确控制切片机的速度和力度，以避免切片破碎或厚度不均。
三、切片的染色与封固
脱蜡：
切片完成后，需要将切片上的石蜡去除，以便进行后续的染色处理。
脱蜡过程通常使用二甲苯等有机溶剂进行。
染色：
脱蜡完成后，切片将进行染色处理。
染色过程通常使用苏木素-伊红（H&E）染色法，即先用苏木素将细胞核染成蓝色，再用伊红将细胞质染成红色。
染色过程需要精确控制染色时间和染色剂的浓度，以确保切片能够清晰地显示组织结构和细胞形态。
脱水与透明：
染色完成后，切片需要进行脱水处理，以去除多余的染色剂和水分。
随后，切片将进行透明处理，以便进行后续的封固处理。
封固：
透明完成后，切片将使用中性树胶或其他适宜的封固剂进行封固。
封固的目的是将切片固定在玻片上，防止切片脱落或损坏，同时使切片更加清晰和易于观察。
四、切片的观察与诊断
观察：
封固完成后，切片即可在显微镜下进行观察。
病理医生将使用显微镜对切片进行仔细观察和分析，以识别病变组织的形态学特征、细胞类型和结构变化等。
诊断：
根据切片的观察结果，病理医生将结合患者的病史、临床表现和其他检查结果，作出明确的病理诊断。
病理诊断是制定治疗方案和评估患者预后的重要依据。
综上所述，病理切片制作过程是一个复杂而精细的流程，涉及多个步骤和环节。每个步骤都需要精确控制和严格操作，以确保切片的准确性和可靠性。通过病理切片的制作和观察，医生能够更深入地了解病变组织的形态学特征和病理变化，为患者的诊断和治疗提供有力的支持。
(侯梦 河南省人民医院 病理科 主治医师)
