当谈及现代医学中的“精准医疗”,我们往往会想到基因测序、个性化药物等高科技手段。然而,在手术室中,一种看似传统的技术——冰冻切片病理,也在默默地为精准治疗贡献力量。这项技术不仅能够确保肿瘤被彻底切除,还能最大限度地保护患者的健康组织。今天,我们就来揭开冰冻切片病理的神秘面纱,了解它在肿瘤切除手术中所扮演的独特角色。
什么是冰冻切片技术?
冰冻切片(Frozen Section)是一种在低温条件下迅速冷冻组织样本,然后进行切片的技术。这种技术的关键特点在于“快速”,可以在手术过程中为病理医生提供即时的组织学信息,帮助做出快速诊断。
冰冻切片的操作步骤:
- 取材:应尽可能使用新鲜的组织材料,避免组织发生死后变化,影响染色分析结果 。
- 速冻:将组织块平放在特制的容器内,加入适量的OCT(Optimal Cutting Temperature)包埋剂浸没组织,然后迅速放入液氮中冷冻大约10-20秒,直至组织迅速结冰 。
- 固定:在样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5-10分钟让OCT胶浸透组织,然后组织置于样品托上,再添一层OCT胶覆盖,速冻30分钟 。
- 切片:使用恒温冰冻切片机,将冷冻组织切成5-10微米厚的薄片。切片时,低温室内温度控制在-15℃至-20℃,以获得高质量的切片 。
- 贴片与固定:将切下的薄片贴附在载玻片上,室温放置30分钟后,使用4℃丙酮固定5-10分钟,然后烘箱干燥20分钟 。
- 染色:进行常规的HE染色或其他特殊染色,例如使用苏木精-伊红染色,以显示细胞和组织的形态结构 。
- 脱水与封片:切片经过一系列乙醇浓度梯度脱水,使用二甲苯透明化,最后用中性树胶封片 。
- 质量控制:注意避免冰晶的形成,保证切片的平整和组织结构的完整性,这对于后续的显微镜观察和分析至关重要 。
- 免疫组化或荧光染色(如果需要):在切片上进行免疫组化或免疫荧光染色,以检测特定的抗原或蛋白质表达 。
冰冻切片技术在肿瘤切除手术中发挥的作用:
- 快速诊断:冰冻切片能够在手术过程中迅速提供病变组织的病理信息,通常在30分钟内即可完成,帮助医生了解病变性质,如肿瘤的良恶性 。
- 指导手术方案:通过术中冰冻病理诊断,医生能够确定肿瘤的性质、扩散情况等,从而决定是否需要扩大切除范围或进行淋巴结清扫等进一步手术 。
- 减少患者风险:术中快速诊断有助于避免或降低患者二次手术的风险,确保肿瘤及周围组织被彻底切除,减少复发可能性 。
- 提高手术效率:快速病理诊断减少了手术等待时间,提高了手术效率 。
然而,冰冻切片技术也存在一些局限性:
- 制片质量:由于制片速度快,可能会导致组织结构的某些细节不如常规石蜡切片清晰,影响诊断的准确性 。
- 取材局限性:术中通常只能选取少量组织进行观察,可能无法全面反映病变的性质,造成与术后病理诊断结果不一致 。
- 技术局限性:快速冷冻过程可能会对组织造成损伤,形成冰晶,影响细胞形态的观察 。
- 诊断时限制:受冰冻诊断时间限制,某些病变的良恶性质、组织来源需要通过免疫组织化学染色、分子病理等检测手段进行辅助诊断,这些在短时间内无法完成 。
- 病理医师经验:病理医生的诊断结果具有重要性,在赋予高度责任的同时,必须在紧张的情绪和环境中保持冷静和清醒的思维,配合手术医师妥善处置术中面临的病理问题 。
尽管存在局限性,冰冻切片技术在肿瘤切除手术中的作用不容忽视,为临床提供了及时的病理信息,有助于提高手术的成功率和患者的预后。然而,其结果通常被视为初步诊断,最终诊断还需依赖术后的常规石蜡切片结果 。
(席乐峰 郑州颐和医院 病理科 主管技师)