不少人在体检或胸部CT检查中回发现自己有肺结节，这些小阴影可能是良性瘢痕、钙化灶，也可能是早期肺癌的征兆。一直以来，肺结节性质的判断都是临床诊断的难点问题。特殊染色技术作为一种先进技术手段，可以通过显微镜帮助医生鉴别肺结节性质。

一、引言，什么是特殊染色

特殊染色是一类针对特定组织成分的化学染色技术，通过试剂与目标物质（如蛋白质、多糖、纤维）发生特异性反应，产生颜色变化。与常规苏木素-伊红（HE）染色相比，特殊染色能突出显示某些关键结构，如同为黑白照片添加色彩标签。

二、鉴别肺结节性质的挑战

肺结节并不是单一的疾病，而是多种病理改变的统称。良性结合包括炎性假瘤、肉芽肿、错构瘤。恶性结节则包括：腺癌、鳞癌、转移癌。

一般CT检查可以显示出结节的大小、密度、边缘特征，但是某些炎性结节与早期肺癌在CT上很难进行区分。同时直径小于1厘米的结节也可能缺乏典型恶性特征。还有些结节需要长期随访，对其生长速度进行观察才可以避免延误治疗的最佳时机。 

三、特殊染色对肺结节性质的诊断

1.弹力纤维染色（EVG染色）：

    肺部的弹力纤维网络就像是建筑的钢筋骨架，确保肺泡具有回弹力，并保证气道结构完整。弹力纤维染色通过碱性品红与铁苏木素的复合作用，让弹力纤维呈现出明显的黑蓝色，可以与周围的胶原纤维色彩产生明显对比。在诊断肺结节时，弹力纤维染色技术能够更为直观地了解病变给肺实质结构造成的破坏。良性病变能够将弹力纤维框架完整的保留下来，并且能够在染色图像中看到均匀、连续的蓝黑色线条环绕着肺泡结构。而恶性肿瘤则会突破基底膜，使得弹力纤维出现扭曲、锻炼，甚至消失的情况。弹力纤维染色在鉴别早期肺癌是有重要作用，原位癌的弹力纤维层没有破坏，而微浸润癌则出现局部纤维断裂。此外，弹力纤维染色可以展现出肿瘤细胞侵袭血管的情况，癌细胞穿透血管壁时，紧密的弹力纤维层会出现破裂，这是诊断肿瘤侵袭性的重要依据。这种弹力纤维染色方法操作比较简单，成本也很低，但是要想解读这一结果，需要医生有丰富的经验，还需要结合常规HE染色进行综合性判断分析。

2.黏液染色（AB-PAS染色）：

肺腺癌等肿瘤经常会分泌大量黏液，运用常规染色方法鉴别这些透明物质有一定难度，但可以在黏液染色下显形。黏液染色整合了阿尔辛蓝（AB）与过碘酸雪夫（PAS）染色原理，AB染色可以将酸性黏液中的硫酸化多糖染成湛蓝色；PAS染色可以将中性黏液中的糖蛋白染成紫红色。通过这种方法能够判断黏液的存在以及化学构成。诊断肺腺癌时，黏液染色能够展现出癌细胞排列在肺泡壁，黏液充斥整个肺泡腔，染色后形成红蓝交织的图像。实体型腺癌的黏液则存在于细胞中，需要使用高倍镜对PAS阳性的紫红色颗粒进行观察。此外，这一技术还能够有效地鉴别原发和转移癌，肺原发腺癌大多是AB/PAS混合阳性，而胃肠来源的转移性黏液癌一般呈现出PAS阳性，这是因为不同器官黏液成分的分子特点不同。但要注意，染色时要对缓冲液pH值有效控制，防止酸性环境影响结果。还需要确保坏死组织释放的糖原不会影响染色结果，可以提前使用淀粉酶消化提前处理干扰因素。

3.网状纤维染色（银染）：

网状纤维是细胞外基质的核心成分，其在肺组织中形成精细化三维网络，对上皮细胞起到支撑作用，以保证组织结构。银染技术借助硝酸银与纤维中特定氨基酸的还原反应，使网状纤维变为黑色的细丝，形成轮廓清晰的支架。这种染色方法在诊断神经内分泌肿瘤时有重要作用，同时银染也可以为良恶性结节的诊断提供动态化依据，良性病变的网状纤维通常排列比较整齐，能够与周围组织和谐相处。但是恶性肿瘤会有侵袭性，导致周围纤维支架受到挤压、断裂等破坏。同时，网状纤维染色还能够对基底膜完整程度进行评估。这种方法的染色结果有很强的稳定性，切片能够长时间保存。但是要对染色时间严格管控，避免过度反应加深背景，将细微结构特点遮掩掉。

4.免疫组化（IHC）：

    免疫组化可以深入到分子层面，借助抗原-抗体的特异性揭示出肿瘤的秘密。这种技术是通过标记抗体与目标蛋白相结合，让分子信号转变为可以通过眼睛能够看到的颜色或荧光。肺结节诊断过程中，IHC标志物能够构成比较精准的诊断矩阵：肺腺癌中，TTF-1的核阳性表达可以区分9成以上的原发肺腺癌与多数转移性腺癌；肺鳞癌以P40/P63为特异性标志，可以与腺癌标志物实现互补。增殖标志物Ki-67借助染色强度对肿瘤细胞增殖活性进行量化，确保后续评估工作更加科学合理。免疫组化在分子特异性上展现出明显优势，即使是形态比较相似的低分化肿瘤，也可以利用标志物的不同表达进行类型划分。但是这种技术要求操作达到较高标准，抗体稀释度、孵育时间、抗原修复方法等变化都可能会结果产生影响，利用阳性/阴性对照严格管控。

    现如今，病理诊断技术不断发展，很多新技术出现并应用于医疗诊断中。特殊染色是病理染色技术中十分重要的组成部分，能够弥补HE染色在诊断中的不足，帮助医生科学的鉴别出肺结节的性质，进而开展针对性治疗。