HE染色是现代医学常用的一种组织切片染色方法,全称为苏木精-伊红染色。该技术可以将细胞、组织结构的清晰图像展现出来,利用不同颜色对比,帮助病理医生、研究者作出科学且精准的诊断分析。
一、HE染色的原理
HE染色是通过苏木精和伊红两种染料的密切配合,对组织中不同成分进行选择性染色。苏木精是碱性染料,其对细胞核中的酸性成分表现出很强的亲和力,能够将细胞核染成蓝紫色。伊红是一种酸性染料,可以与细胞质中的碱性成分(如蛋白质的氨基)结合,使细胞质、胶原纤维等染成粉红色或红色。在这两种染料的相互配合下,能够让细胞中不同组分在显微镜下自然分层,展现出组织切片的细节,如细胞核、细胞质以及其他细胞器的结构和分布。
在具体染色中,苏木精颜色强度要利用分化液适当将一些过度染色的情况去掉,在利用返蓝液让细胞恢复到明亮的颜色。对于伊红,要科学管控染色时间。在最终HE切片中,应做到红蓝分明,以便清晰分辨各种组织结构、细胞边界等。
二、HE染色的步骤
1.制备组织切片:
要将组织样本固定在福尔马林溶液中,使其原有结构得以保留下来。将样本嵌入到石蜡中,将其切割为厚度均匀的4-6微米切片。将切片放置到载玻片上,做好脱蜡和再水化处理工作,以便等待进行染色。
2.脱蜡与再水化:
切片经过二甲苯、乙醇等溶剂脱蜡处理之后,再用水对其再水化,准备进行染色。
3.苏木精染色:
将切片放置到苏木精染液中,染色数分钟后,再用自来水冲洗。这一步能够让细胞核显现出蓝紫色。
4.分化与返蓝:
分化这一环节利用酸性乙醇或其他分化剂,从而将非特异性染色去除,提高染色的清晰程度。返蓝环节一般使用碱性水溶液旨在让细胞核呈现出理想的蓝色。
5.伊红染色:
然后将切片放置到伊红染液中染色数分钟,从而让细胞质和其他组织成分展现出粉红色、红色。
6.脱水与封片:
切片通过酒精脱水和二甲苯透明化处理之后,进行封片处理,从而便于显微镜观察。
经过上述步骤,HE染色切片可以通过显微镜展现出蓝紫色的细胞核和粉红色的细胞质,清晰地看到组织结构。
三、HE染色具体应用
HE染色在各种组织病理学研究、临床诊断中有着很好地应用。不管是炎症、肿瘤还是退行性病变,或是其他组织结构出现异常,HE染色都能够为医生提供十分关键的诊断信息。如对于肿瘤病理,医生通过HE染色可以直接看到肿瘤细胞的具体形态、排列方式,明确肿瘤与周围正常组织间的关系,进而判断肿瘤的具体性质以及达到的恶性阶段。除此之外,在研究肝脏、肾脏、肺脏等内脏器官时,HE染色也发挥着重要作用。通过对不同器官组织切片进行观察,医生能够尽早发现早期患者的病变迹象,比如肾小球病变、肺泡结构异常等。这对于患者的诊断以及治疗有着十分重要的影响。
四、解读HE染色切片
虽然HE染色操作起来比较简单,但是要想对切片中的信息精准解读,还需要有丰富、扎实的病理学知识和经验作为前提。在对HE染色切片解读时,需要注意以下几点。
1.细胞核的形态与染色强度:
HE染色中,细胞核一般为蓝紫色,细胞的功能情况会影响到核形态和染色强度。如对于恶性肿瘤,细胞核可能会有十分显著的异形性,核染色更深,这能够充分表示出细胞的增殖活跃程度以及恶性情况。
2.细胞质的染色:
细胞质一般为粉红色,但由于组织类型以及病理情况不同,其染色强度和颜色也会有所差异。如对于炎性病变,细胞质由于水肿可能会染色变浅,而对于一些分泌性细胞中,细胞质会因为分泌颗粒比较多而使染色加深。
3.组织结构的完整性:
HE染色能够为准确判断组织结构、组织间提供助力。解读过程中,应明确组织结构的完整性、排列的顺序性,同时了解有无坏死、纤维化、瘢痕等病理情况出现。
4.特征性病变的识别:
某些疾病以及病理状态会呈现出特征性组织学改变。如肝硬化HE染色切片中,能够看到假小叶以及纤维间隔的产生。慢性肾小球肾炎切片中,能够看到肾小球硬化以及肾小管萎缩等病变情况。
五、现代医学中HE染色的重要性
现如今,医疗卫生技术快速发展,医学领域中出现了很多新的染色技术以及分子标记方法,但是在临床病理诊断中HE染色依旧是“黄金标准”。这是因为HE染色操作比较简单,成本低,能够为医生提供大量组织学知识和信息。当前,HE染色在很多复杂的病理诊断中依旧是初步筛查分析的重要工具。
与此同时,HE染色在医学教育工作中也发挥着重要作用。通过对HE染色切片进行观察,医生能够明确其基础组织学以及病理学知识,为后续的临床诊断提供科学的依据。另外,科学研究中也有HE染色的身影,特别是组织学研究、药物毒理学研究中。
HE染色的出现让医生的显微镜世界变得色彩鲜艳,能够更为深入地对组织以及细胞微观结构进行观察。如果可以正确的运用和解读HE染色,医生以及研究人员就可以更为精准地作出病情诊断,并开展科学研究。因此不管是临床医疗中还是研究领域中,HE染色都有着不可忽视的重要地位。
总之,HE染色作为医学诊断的重要手段之一,其在未来有着广阔的发展和应用前景。相信随着人们对于各种疾病的深入了解和研究,HE染色技术也能够在今后医学以及科学研究中发挥出更大作用。
(廖朝平 广西河池市人民医院 病理科 主管技师)