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肺炎支原体RNA检测知多少

2024-06-11 00:25 河南广播电视台安全健康直通车

肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, MP)是一种常见的病原微生物,是儿童呼吸道感染的主要致病菌。支原体是大小介于病毒和细菌之间的一种致病微生物,有一百多种,从人类身上分离出13种,其中只有4种会引起人类疾病,而最常见的就是MP。MP感染会引起肺炎、哮喘、咽炎、支气管炎、慢性咳嗽等,5岁以上儿童及青少年发病率最高,主要经飞沫传播,潜伏期2~3周,MP起病缓慢,发病初期有咽痛、头痛、发热、乏力、肌肉酸痛、食欲减退、恶心、呕吐等症状。发热一般为中等热度,2~3天后出现明显的呼吸道症状,突出表现为阵发性刺激性咳嗽,以夜间为重,咳少量黏痰或黏液脓性痰。发热可持续2~3周,体温正常后仍可遗有咳嗽。MP感染引发的肺炎初期临床表现往往不典型,若不能及时发现容易造成误诊漏诊。现今,对于MP感染的实验室诊断方法有影像学诊断、分离培养、血清学实验、PCR-DNA和MP-RNA检测等。肺炎支原体RNA检测作为一种快速、准确的诊断方法,具有报告周期短、准确性强、灵敏度及特异度高的特点,临床标本检测中阳性结果通常表明MP活体菌的存在,目前在临床实践中具有重要意义。

    肺炎支原体RNA检测主要基于核酸扩增技术,其中实时荧光定量逆转录PCR技术应用最为广泛。该技术首先通过逆转录酶将肺炎支原体RNA逆转录为互补DNA,然后以cDNA为模板进行PCR扩增。在扩增过程中,利用特异性的引物和荧光探针,随着扩增产物的增加,荧光信号强度也相应增强,通过检测荧光信号的变化实时监测扩增过程,并根据标准曲线对样本中的肺炎支原体RNA含量进行定量分析。其原理依据的是PCR技术的指数扩增特性,能够在短时间内将极微量的核酸片段大量扩增,从而实现对低拷贝数RNA分子的灵敏检测。

    样本采集通常采用咽拭子或鼻咽拭子,采集过程需严格遵循无菌操作原则,以确保样本的质量和准确性。采集后的拭子应立即放入含有特定保存液的采样管中,保存液不仅能保护核酸不被降解,还能抑制细菌和真菌的生长。在实验室检测环节,首先对样本进行核酸提取,通过裂解病毒颗粒释放出RNA,并去除蛋白质、多糖等杂质,获得纯净的核酸提取物。然后进行逆转录和PCR扩增反应,反应体系中包含优化的缓冲液、dNTP、引物、探针、逆转录酶和Taq DNA聚合酶等关键成分,以保证扩增反应的高效性和特异性。整个检测过程在专门的实时荧光定量PCR仪器上进行,仪器能够精确控制反应温度和时间,并实时采集荧光信号,通过配套的软件对数据进行分析和结果判定。

    肺炎支原体RNA检测具有高灵敏度和特异性,相较于传统的血清学检测方法,能够在感染早期检测到病原体核酸,大大缩短了窗口期,有助于及时明确诊断,为患者的治疗争取宝贵时间。尤其对于临床表现不典型的患者,如仅有轻微咳嗽、发热等症状,易与其他呼吸道疾病混淆时,肺炎支原体RNA检测可提供快速准确的鉴别诊断依据,避免因误诊而延误治疗或滥用抗生素。

在疾病监测方面,肺炎支原体RNA检测可用于追踪肺炎支原体在社区或特定人群中的流行趋势,帮助公共卫生部门及时掌握疫情动态,制定相应的防控措施,如加强学校、幼儿园等人员密集场所的通风消毒、开展健康宣教等,有效预防肺炎支原体感染的大规模爆发。同时,对于临床治疗效果的评估也具有重要价值,通过定期检测患者体内肺炎支原体RNA水平的变化,医生能够直观地了解病原体的清除情况,从而合理调整治疗方案,确保治疗的有效性和规范性,减少并发症的发生,促进患者康复,降低疾病负担和医疗成本,在呼吸道感染疾病的诊断、治疗和防控等多个环节发挥着不可或缺的作用,为临床精准医疗和公共卫生决策提供了有力支持。

总之,肺炎支原体RNA检测灵敏度高、特异性好,临床实用性强,能够较好监测MP流行趋势,另外,能够反映病原体活动状态、监测治疗效果,是目前前沿的检测指标,有利于MP感染的早期快速诊断、判断疗效。

(李林飞 河南省儿童医院郑州儿童医院 儿科医学研究所 副主任技师)


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