一、先说说：普通染色搞不定的，免疫组化来“破案”
病理科医生看切片，就像侦探查案。普通HE染色（染细胞核蓝色、细胞质红色）能看出细胞的“长相”（大小、形状、排列），但遇到“长得像坏人的好人”或“伪装成好人的坏人”，就分不清了。比如有些肿瘤细胞，在HE染色下和正常细胞长得很像，医生很难判断它的“真实身份”。
这时候就得请免疫组化染色出场——它能给细胞贴上“专属标签”（比如“这是癌细胞”“这是激素依赖型肿瘤”），让隐藏的信息显形。在妇幼保健院，免疫组化常用于判断乳腺癌的分子类型（看是否依赖雌激素）、鉴别宫颈肿瘤的来源，堪称病理诊断的“放大镜+身份证识别系统”。
二、免疫组化的原理：“抗体找抗原”，就像“钥匙开锁”
细胞里藏着很多“抗原”（比如蛋白质、激素受体），不同类型的细胞，抗原种类和数量不一样（就像每个人的身份证号不同）。免疫组化的核心，是用“抗体”（专门识别抗原的蛋白质）去寻找对应的抗原，找到后就会“绑定”，再通过显色让它们显形。
1.抗体是“定制钥匙”，只开特定“锁”（抗原）
每种抗体都是“定制款”，只认识一种抗原。比如要找乳腺癌细胞的“雌激素受体”（一种抗原），就用“抗雌激素受体抗体”——这种抗体像带着GPS的钥匙，在组织切片里逛一圈，遇到雌激素受体就会牢牢抓住，绝不认错人。
如果细胞里没有对应的抗原，抗体就会“擦肩而过”，不会停留，保证“标签”贴得精准。
2.显色剂让“绑定部位”变颜色，在显微镜下看得见
抗体和抗原绑定后，还得让它们“显形”。这时候会加“显色剂”（比如DAB），显色剂会和抗体结合，让绑定的部位变成棕黄色（像给抗原打上了棕色的“标签”）。
在显微镜下，棕黄色的地方就是“有抗原”，颜色越深说明抗原越多；没有棕黄色的地方就是“没有这种抗原”，一目了然。
三、染色步骤：五步走，给细胞“贴标签”有讲究
免疫组化染色是个“精细活”，步骤多且不能出错，不然会“贴错标签”（假阳性）或“漏贴标签”（假阴性）。
1.第一步：“脱蜡抗原修复”，让抗原“露出来”
做免疫组化的切片，大多是普通切片（石蜡包埋），石蜡会盖住细胞里的抗原，所以先要脱蜡（和普通切片脱蜡步骤一样），再用高温或酶处理（抗原修复），把抗原从细胞里“解放出来”，让抗体能找到它们。
这一步就像给礼物拆包装，不拆包装，里面的东西（抗原）再特别也没人知道。
2.第二步：“阻断endogenous过氧化物酶”，避免“假阳性”
细胞里有种“过氧化物酶”，会干扰显色（自己也能让显色剂变颜色）。所以要先加“阻断剂”（比如过氧化氢），让过氧化物酶失去活性，保证后续的颜色都是“抗体-抗原绑定”产生的，不会有“冒牌货”。
3.第三步：“孵育抗体”，让抗体和抗原“约会”
把切片泡在抗体溶液里（温度控制在37℃左右，像给抗体和抗原创造“约会氛围”），让抗体慢慢找对应的抗原。这个过程要花1-2小时（有的抗体需要过夜），保证每个抗原都有机会被找到。
如果是“加急免疫组化”，会用更高浓度的抗体或提高温度，缩短“约会时间”（30分钟），但效果可能稍差一点。
4.第四步：“加二抗和酶”，放大信号让颜色更明显
有时候抗体和抗原绑定的信号太弱，颜色浅看不清，这时候会加“二抗”（能识别一抗的抗体）和“酶”（比如辣根过氧化物酶）。二抗会抓住一抗，酶会附着在二抗上，相当于给信号“放大”了几十倍，显色后颜色更深，更容易观察。
5.第五步：“显色、复染”，给标签“描边”
加显色剂（DAB）后，绑定了抗体的部位会变成棕黄色（抗原的位置）。为了让细胞结构更清晰，还要用苏木素“复染”（让细胞核变蓝色），这样棕黄色的标签（抗原）和蓝色的细胞核对比明显，医生一眼就能看出“哪些细胞有抗原，在哪个位置”。
四、免疫组化常用来解决这些问题
免疫组化不是所有病例都需要做，主要用在普通切片诊断不清的情况，在妇幼领域有三个常见用途：
1.给肿瘤“分型”，指导治疗
-乳腺癌：通过检测“雌激素受体（ER）”“孕激素受体（PR）”“HER2蛋白”，把乳腺癌分成不同类型（比如ER阳性型），医生就能知道用哪种药（比如ER阳性可以用抗雌激素药物）。
-卵巢肿瘤：区分是上皮来源还是生殖细胞来源（不同来源的肿瘤，治疗方案完全不同）。
2.判断肿瘤“良恶性”或“侵犯范围”
有些肿瘤长得“模棱两可”，普通切片看不出来是良性还是恶性。免疫组化通过检测“增殖指数”（比如Ki-67抗原，数值越高说明细胞分裂越活跃，恶性可能越大），帮助医生判断。
3.找“微小转移灶”，避免漏诊
比如宫颈癌手术后，检查淋巴结有没有微小转移（普通切片可能看不见），用免疫组化检测“细胞角蛋白”（癌细胞特有的抗原），能发现只有几个癌细胞的微小转移灶，让诊断更精准。
五、免疫组化的“优缺点”：精准但耗时，不能替代普通切片
1.优点：标签精准，能解决“疑难杂症”
普通切片像“看长相识人”，免疫组化像“查身份证号”，对疑难病例的诊断准确率能提高30%以上，是病理诊断的“终极武器”之一。
2.缺点：耗时、花钱，结果受抗体质量影响
-做一次免疫组化要1-2天（比普通切片久），费用也更高（一项指标几十到几百元，复杂病例要做好几项）。
-如果抗体质量差（比如过期、交叉反应），可能出现“假阳性”（没抗原却显色）或“假阴性”（有抗原却不显色），影响判断。
所以，免疫组化是“普通切片的补充”，不是“替代者”，两者结合才能做出最准确的诊断。
六、患者不用懂原理，知道这些就够了
对患者来说，不用明白免疫组化的具体步骤，只要知道：
1. 医生让做免疫组化，不是病情加重了，而是为了更精准地诊断（就像做题遇到难题，需要用更高级的公式）。
2. 免疫组化结果出来后，医生会结合临床情况制定更精准的治疗方案，耐心等待就行。
总结：免疫组化，给细胞“贴标签”的“火眼金睛”
免疫组化通过“抗体找抗原”的原理，给不同细胞贴上专属标签，让原本看不清的细胞身份变得清晰。在妇幼保健院，它帮助医生给肿瘤分型、判断良恶性、指导治疗，是病理诊断中不可或缺的“精准工具”。
虽然过程复杂、耗时花钱，但它能让诊断更准确，让治疗更有效——对患者来说，这就是免疫组化最大的价值。
(高云燕 洛阳市妇幼保健院 病理科 主管技师)
